Relatório Aula Prática - Colorimetria e Espectrofotometria

Materiais e Métodos

1- Equipamentos e Vidrarias:

→ Espectrofotômetro com cubetas, corantes, estante, tubos de ensaio, pipetadores automáticos e ponteiras;

→ Preparo dos corantes: Verde Brilhante, Azul de Metileno, Alaranjado de Metila e Vermelho de Metila

2- Determinando o espectro de absorbância das amostras

Procedimento:

A) Coleta de dados para a construção do espectro de absorção;

B) A partir da solução estoque, preparar a diluição do corante em um tubo de ensaio utilizando uma parte (volume) de corante para nove partes (volumes) de água, ou seja, numa proporção de 1:9. Essa diluição será utilizada para as leituras no espectrofotômetro. Lembre-se que agora você tem uma nova concentração na amostra a ser lida.

C) Preparar 1 cubeta com água e as demais com amostras dos corantes;

D) Usando água destilada como referência, efetuar as leituras de Absorbância (ou D.O.) do corante realizando a leitura no espectro entre o comprimento de 400 a 800nm em intervalos de 20nm.

E) Preencher a tabela como segue e plotar o respectivo gráfico para cada corante.

Obs. Calibrar com o branco (Água destilada) a cada troca de comprimento de onda no espectrofotômetro e aí realizar a leitura.

	Azul de Metileno	Verde Brilhante	Alaranjado de Metila	Vermelho de Metila
nm	Abs	Abs	Abs	Abs
400	0,120	0,324	0,801	0,050
420	0,082	0,618	0,928	0,083
440	0,111	0,533	1,022	0,050
460	0,160	0,137	1,041	0,066
480	0,234	0,049	1,102	0,048
500	0,329	0,116	1,056	0,035
520	0,374	0,253	0,845	0,021
540	0,585	0,465	0,289	-0,004
560	0,866	0,863	0,037	0,007
580	1,056	1,066	-0,025	-0,005
600	1,027	1,046	-0,027	-0,004
620	1,004	1,041	-0,035	-0,004
640	1,009	1,000	-0,048	-0,023
660	1,009	0,893	-0,031	-0,004
680	0,917	0,272	-0,045	-0,018
700	0,567	0,025	-0,045	-0,020
720	0,230	0,000	-0,051	-0,027
740	0,108	-0,041	0,000	-0,020
760	0,047	-0,011	-0,045	-0,017
780	0,023	-0,043	-0,016	-0,017
800	0,016	-0,003	-0,039	-0,011

F) Utilizando os dados da tabela plotar um gráfico (eixo X= comprimento de onda em nm) e (eixo Y = leitura em absorbância). Qual (ais) o (os) comprimento (s) de onda correspondente (s) ao Pico (s) de absorção da luz para cada corante? Explique.

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