As Lesões Histopatologia

Lesões histológicas no sistema nervoso central de cão com encefalite e diagnóstico molecular de infecção pelo vírus da cinomose canina.

  O vírus da cinomose canina (canine distemper virus - CDV) é um importante patógeno que determina altas taxas demortalidade, com letalidade inferior apenas à raiva canina (Shell, 1990). O diagnóstico clínico   pode ser confirmado pela identificação decorpúsculos de inclusão em células associadas a exudato, em células epiteliais e em neutrófilos, porém sua ausência não exclui a infecção pelo CDV (Motohashi et al., 1969). Atualmente, a técnica da reação em adeia pela polimerase precedida de transcrição reversa (RT- PCR) em sendo empregada com sucesso na detecção do CDV em diferentes tipos de amostras biológicas provenientes de cães com sinais clínicos sistêmicos e neurológicos (Frisk et al., 1999).

  Dez cães, previamente avaliados pela técnica da RT-PCR para o diagnóstico do CDV, foram distribuídos em dois grupos (A e B) de acordo com a faixa etária (menos de seis meses e acima de 12 meses) e a presença de sinais clínicos sistêmicos e neurológicos. Para a realização da RT-PCR foram utilizados os oligonucleotídeos iniciadores CDV1 (+) [5’-aca   gga ttg ctg agg acc tat-3’, nt 769-789] e CDV2 (-) [5’-caa gat aac cat gta cgg tgc-3’, nt.1055- 1035], desenhados a partir da seqüência do gene que codifica a nucleoproteína do CDV e que amplificam um produto de 287pb (Frisk et al., 1999).

  A especificidade dos produtos amplificados na RT- PCR foi avaliada pela análise do perfil de restrição com a enzima Hinf I (10 unidades/μl)2, selecionada pela análise no software Gene Runner. Os produtos amplificados pela RT-PCR e os clivados com a enzima de restrição foram analisados por eletroforese em gel de agarose a   2% em tampão TBE pH 8.4 (TRIS 89 mM, ácido bórico 89 mM, EDTA 2 mM), corado com brometo de etídeo (0,5μl/ml) e visualizado sob   luz ultravioleta.

 Os astrócitos são as células-alvo do vírus no SNC e estão envolvidos no processo de desmielinização que ocorre na encefalite aguda e crônica observada em cães e outros carnívoros   com infecção pelo CDV (Zubriggen et al., 1995). Este resultado pode te sido influenciado pelo número e local dos cortes histológicos avaliados, bem como pela falta de   tempo hábil, após a infecção, para o desenvolvimento de lesões no epitélio vesical. Essa técnica possibilitou a detecção do ácido nucléico do CDV na urina de cães tanto com encefalite   aguda quanto crônica, evidenciando a virúria, mesmo não sendo encontradas alterações histológicas na bexiga.