Microcultivo

TÉCNICA DE MICROCULTIVO PARA FUNGOS

Objetivos: Observação das características morfológicas das hifas e corpos de frutificação dos fungos, utilizados como critério de identificação

Princípio: O microcultivo se fundamenta na cultura do fungo em pequenos pedaço de meio de cultura, entre lâmina e lamínula, onde o crescimento do fungo se espande e fixa na porção inferior da lamínula, que quando retirada com cuidado mantém as estruturas que formam esporos (corpo de frutificação), intacta, o que facilita melhor identificar as características dos fungos

Material: placa contendo ágar sabouraud, placa de Petri, lâmina, lamínula, chumaço de algodão hidrófilo, papel de embrulho, estilete ou alça de platina estéril, Inoculo de fungo (Rhizopus, Penicillium e Aspergilus), pipetas, gota de azul de metileno, microscópio.

Métodos:

• Colocar dentro de uma placa de Petri, uma lâmina, uma lamínula e um chumaço de algodão hidrófilo, acondicionar em papel de embrulho e esterilizar por autoclavação;

• Com auxílio de um estilete ou alça de platina estéril, cortar o ágar Sabouraud em pedaço quadrados de ±15mm e depositar sobre a lâmina que está dentro da placa;

• Inocular o fungo (ou material biológico) nos 4 lados do pedaço do ágar e cobrir com a lamínula;

• Adicionar cerca de 2ml de água estéril ao chumaço de algodão dentro da placa[1] e incubar a placa a 28ºC por 24 a 72 horas

• Após o crescimento do fungo, retirar cuidadosamente a lamínula e colocar sobre uma gota de azul de metileno depositada no centro de uma lâmina.

• Observar ao microscópio em lente de 40X

Resultados: Observar as estruturas que formam os esporos, bem como a disposição das hifas (desenhar e comparar com o manual

A identificação dos fungos é baseada quase que exclusivamente em sua morfologia tanto macro como microscopicamente. Macroscopicamente os fungos podem apresentar vários tipos morfológicos com colônias filamentosas, cotonosas, pulverulentas e outras (bolores) e cremosas (leveduras) e com os mais diversos tipos de pigmentos.

A unidade estrutural dos fungos é representada pela hifa e o conjunto desses elementos é denominado micélio. Os fungos têm como habitat, os mais diferentes substratos