MICROSCOPIO DE LUZ FACULDADE NOSSA SENHORA DE FÁTIMA

      FACULDADE NOSSA SENHORA DE FÁTIMA

CURSO: Bacharel em Enfermagem

PROFESSORA: Claúdia Laurindo

Aluna: Terezinha Soares

Trabalho de Histologia

Técnicas de Preparação

Para que se conseguissem tratar algumas doenças, era necessário observa de muito perto e para isso o microscópio começou a ser a ferramenta mais importante. Mas para ser feita a análise, o material analisado precisava ser fino para que a luz a ultrapassasse.

 Então, depois de algum tempo, foram criados procedimentos para observação de estruturas maiores e sem coloração, foi chamada de Técnica Histológica,essa técnica é dividida nas seguintes etapas.

Coleta do material, fixação, clivagem, descalcificação, processamento, inclusão, microtomia, coloração, selagem e observação ao microscópio. Primeiro é feita a coleta dos tecidos, com cuidado, através de biópsia das peças cirúrgicas  para necropsias.  

Em seguida, o matéria é colocado em um recipiente com fixador e fechado rapidamente, para que não ocorra a evaporação do mesmo.

 A clivagem é o processo de redução do tamanho da amostra para que haja melhor fixação. A fixação pode ser classificada em dois grandes grupos, a fixação física e a fixação química.

 A fixação física preserva a amostra por aquecimento ou resfriamento. Na  química, é feita pela ação de agentes químicos, os principais são, agentes oxidantes, agentes desmaturantes, fixadores de mecanismos desconhecidos, fixadores aldeídos e suas combinações.

 Os mais utilizados são os fixadores aldeídos, pela sua facilidade, baixo custo, resultados uniformes e qualidade satisfatória.

Os principais fatores que influenciam a fixação são, a temperatura, o volume da mistura fixadora, a concentração, o pH da mistura, osmolaridade, espessura da amostra e o tempo de fixação.

Após o tempo estipulado para fixação, o material deve ser lavado dependendo do tipo utilizado de fixador. Descalcificação é o processo de retirada de cálcio do tecido ósseo.

São utilizados descalcificadores a base de ácidos, histoquímicos, soluções descalcificadoras patenteadas, resinas de troca iônica e descalcificadores eletrolíticos.

 O tecido é envolvido em uma gaze e amarrado com um barbante, de maneira que não encoste no fundo do recipiente, com uma solução descalcificadora, em seguida é levado em uma placa agitadora e ao término é lavado em água corrente,são procedimentos para substituir a água dos tecidos por um meio mais solido.

São feitas em três etapas: a desidratação, a clarificação e a infiltração, o processo pode ser manual ou automático, normalmente é utilizado o automático por ser mais rápido, evitando falhas e para controlar a temperatura.

 Inclusão, é a etapa onde o tecido é incluído em um molde com parafina. A inclusão é feita em uma central de inclusão,o tecido é colocado no molde já preenchido com parafina junto com sua identificação e depois são resfriados, após atingir o ponto em que está seco, o bloco é removido do molde. Em seguida é feita a microtomia utilizando o micrótomo, é o procedimento em que os blocos com os tecidos são cortados em fatias finas. Logo após a  lavagem e identificação das lâminas, utiliza-se uma substância para que o tecido seja aderido a lâmina.,assim, as lâminas são levadas a uma estufa com temperatura apropriada. A coloração tem o objetivo de tornar visível os tecidos no microscópio. A hematoxilina e a eosina são as substancias mais utilizadas. Primeiramente, é removida a parafina dos tecidos, então o corante é depositado em um recipiente com as lâminas. Em seguida, as lâminas são deixadas em água corrente para que ocorra a viragem do corante. E então, as lâminas são mergulhadas em álcool para preparar os cortes para a coloração de eosina. Para remover o excesso de corante, são lavadas novamente com álcool. Então é feita a selagem, o mais recomendado é a Goma de Damar. É colocado uma gota da Goma de Damar na lâmina com o tecido e em seguida selada com outra lamina. Logo, as lâminas estão prontas par observação no microscópio. 

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