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Solutos - Hemolise

Por:   •  5/4/2019  •  Abstract  •  267 Palavras (2 Páginas)  •  221 Visualizações

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Objetivo

Demonstrar e ilustrar os seguintes aspectos relacionados com o movimento de água através da membrana celular:

  • Osmose
  • Pressão osmótica
  • Equilíbrio osmótico
  • Osmolaridade
  • Fluxo de volume
  • Coeficiente de reflexão

Materiais

  • Heparina ou oxalato de sódio (anticoagulantes)
  • Sangue
  • Bastão de vidro
  • Papel absorvente
  • Estante para tubos de ensaio
  • 18 tubos de ensaio de 15ml
  • Água destilada
  • 8 pipetas cilíndricas de 10ml
  • Luvas
  • Centrifuga

Soluções

  • NaCl 150 mM, 500mM e 1000mM
  • Ureia 300mM e 500mM
  • Sacarose 300mM e 500mM
  • Cloreto de Amônio 150mM

Métodos

1 – Coletar 2 ml de sangue humano e adicionar anticoagulante na concentração aproximada de Heparina: 0,2 mg/ml ou Oxalato de Na+: 1 a 2 mg/ml de sangue;

2 – Preparar uma bateria de 11 tubos de ensaio contendo soluções de NaCl de concentrações decrescentes, obtidas por mistura de agua a NaCl – 150mM nas seguintes proporções de volume (ml): 0/10; 1/9; 2/8; ... 9/1; 10/0. Homogeneizar a mistura por agitação;

3 – Colocar 10 ml das soluções abaixo discriminadas em tubos de ensaio distintos: NaCl 500 mM e 1000nM; Ureia 300 mM e 500mM; Sacarose 300 mM e 500mM; NH4Cl 150mM;

4 – Adicionar 80 µL de sangue (3 a 4 gotas) a cada um dos tubos, cobrir com o dedo polegar limpo e inverter os tubos lentamente para misturar sem formação de espuma;

5 – Centrifugar os tubos 13.000 rpm durante 3 minutos. Retira-los cuidadosamente da centrifuga. Observar o aspecto do sobrenadante, o volume e o aspecto do sedimento. Descrever os fatos observados, classificar e anotar os tubos de acordo com o aspecto das soluções.

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