Coliformes Totais

MATERIAIS E MÉTODOS

Salmonella

O isolamento de Salmonella spp., bem como sua confirmação e caracterização bioquímica e sorológica tem que ser realizados segundo metodologia preconizada pela APHA [3] , utilizando-se um enriquecimento primário em Água Peptonada Tamponada (APT), seguido de um enriquecimento seletivo em Caldo Tetrationato (TT) e Caldo Rappaport-Vassiliadis (RV). Após, inoculados os Ágares Hektoen-enteric (HE) e Xylose Lisina Desoxicolato (XLD), a fim de obter colônias isoladas típicas de Salmonella spp.. Essas colônias então,tem que ser submetidas a uma triagem bioquímica, feita em uma seqüência de três tubos de ensaio, contendo, respectivamente, Ágar Tríplice Ferro (TSI), Ágar Lisina Ferro (LIA) e Agar Uréia (UA). Os cultivos celulares com características bioquímicas típicas de Salmonella spp. Tem que ser testados sorologicamente, utilizando-se soro polivalente somático e soro polivalente anti-Salmonella flagelar.

Staphilococcus aureus

Isolamento de Staphylococcus aureus.

Cada amostra tem que serpreparada, pesando-se assépticamente 100 g e transferidas para 225 mL de água peptonada (diluição 10 -1). A partir dessa, proceder uma série de diluições decimais até 10-8 em tubos de

ensaio contendo 9 mL de solução salina estéril. São alíquotas de 0,1 mL das 10-5 a 10-8 com o auxílio de alça de Drigalsky em placa de Petri contendo ágar sangue. A seguir as placas serão incubadas a 37 graus C por

48 horas. Após o período de incubação as placas devem ser levadas para um contador de colônias. As colônias típicas em ágar sangue serão transferidas para o caldo nutritivo e após o crescimento foi repicado em ágar sangue.

A partir da cultura obtida em ágar sangue serão realizados testes de catalase e esfregaço em lâmina coradas pelo método de Gram. Se possível serão realizadas testes de coagulase com as colônias típicas de catalase positiva.

Coliformes totais e fecais

As amostras tem que ser coletadas conforme o Método de

“SWAB”, passando-se o “SWAB” estéril em zigue-zag numa

área igual a 1050cm2 (30cm x 35cm) compreendendo

bancada, mãos dos trabalhadores antes do manuseio da carne e depois e na maquina de moer carne.

Os “SWAB”, imersos em água peptonada 0,1%, tem que ser transportados imediatamente para o laboratório de análise.

Com as amostras prepara-se diluições de 10-1 até 10-5

usando-se água peptonada 0,1%.

A análise de coliformes será feito teste presuntivo, semeando-se 1mL das amostras em tubos contendo 10mL de Caldo Lactosado e tubos de Duhram em triplicata para cada diluição. Os tubos deverão ser incubados por 48 horas a 37oC; verificando-se a presença de gás nos tubos de Duhram.

As amostras positivas no Caldo Lactosado tem ser

repicados com auxílio de alça de platina para tubos contendo diluição. Os tubos deverão