Métodos De Contagem Microbiano

Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Ceará – IFCE.

Disciplina: Microbiologia Geral

Prof. Leiliane Teles Cesar

Curso: Tecnologia de Alimentos

2º Semestre

Métodos de Contagem Microbiano

Priscila de Souza Pinto

Sobral, CE

Março de 2014

1. A Inoculação em Placas de Petri pode ser em Superfície e em Profundidade. Explique como são realizadas tais técnicas.

A inoculação em superfície: pode ser realizada de duas formas:

1) Adiciona-se 0.1 mL de uma diluição da amostra com pipeta estéril no centro da placa e espalha-se com o auxílio de uma alça de Drigalski estéril. 2) Inocula-se com a alça de platina, conforme será explicado mais adiante. No item técnica de semeadura.

Inoculação em profundidade: Adiciona-se 1 mL da amostra ou uma de suas diluições no centro de uma placa de Petri vazia. Verter sobre o inóculo 20 mL de meio de cultura fundido e aquecido a 45ºC. Agitar a placa realizando movimentos circulares no sentido horário e no sentido anti-horário ou realizando movimentos em oito. Incubar as placas na posição invertida, uma vez que a elevada concentração de água no meio pode provocar condensação durante a incubação. No meio sólido, cada célula viável dará origem a uma colônia, portanto a inoculação em placas pode ser utilizada, não somente para cultivar microrganismos, como também para contar e isolar. Em geral quando se deseja obter colônias isoladas a partir de um determinado material, é necessário diluir a amostra em tubos com água destilada estéril.

2. As vantagens da contagem padrão em placa são?

• Somente células viáveis são contadas;

• Permite o isolamento das colônias, que podem ser sub-cultivadas em culturas puras, as quais podem ser facilmente estudadas e identificadas.

3. Qual desvantagem pode apresentar?

• Não existe um meio que permita o crescimento de todos os microrganismos;

• É necessária a incubação apropriada para permitir o desenvolvimento das colônias;

• Usa-se muita vidraria e é relativamente trabalhoso;

• A necessidade de muita manipulação pode originar erros nas contagens devido a erros de diluição e/ou plaqueamento.

4. Explique Filtração por membrana.

O método baseia-se na filtração de volumes adequados da amostra diluída através de membrana filtrante com porosidade de 0,45 µm. As bactérias e fungos a serem detectados, apresentando dimensões maiores, ficarão retidas na superfície da membrana, a qual é então transferida para placa de Petri contendo meio seletivo e diferencial.

5. Explique os seguintes métodos de contagem:

a) Contagem