Eletroforese

1. Introdução

Técnica de separação de proteínas utilizando-se de forças eletroforéticas e eletroendosmóticas presentes no sistema. A eletroforese é especialmente utilizada para visualizar proteínas e separá-las, são carregadas eletricamente quando dissolvidas ou supinsas em uma solução tampão, permitindo a um pesquisador estimar o numero de proteínas distintas em uma mistura ou o grau de pureza de uma preparação protéica particular. Além disso, a eletroforese permite a determinação de uma proteína, como o seu ponto isoelétrico e o peso molecular aproximado. As frações separadas são visibilizadas a partir de corante sensível a proteínas.

2. Materiais

• Papel filtro

• Placa de Petri

• Cubas de coloração

• Pinças histológicas

• Secador

• Cronômetro

• Cuba de eletroforese

• Fita gel agarose

2.1 Reagentes

• Soro humano

• Negro de amido

• Acido acético

• Solução tampão

3. Procedimento

Primeiro passo:

- Preparar a solução de Ph 50 mL

- Colocar em partes iguais (acido acético,e solução tampão).

- Preparar a solução dentro da bureta (o Ph c os dois fica neutro)

Segundo passo:

- Pipetar o soro humano pros capilares da fita agarose.

- Pipetar 1 gota em cada canaleta.

- A fita deve estar com números voltados pra gente.

Terceiro passo:

- Abrir a cuba onde esta o negro de amido.

- Pinçar a fita de agarose.

- Introduzir completamente a fita no negro de amido.

- Colorir a fita.

- Colocar em cima do papel para sair o excesso.

Quarto passo:

- Preparar a cuba de eletroforese.

- Colocar toda solução na cuba.

- Encaixar a fita na cuba.

- Ajustar pra 60 min 10 Wts

- Ligar a fonte de eletroforese.

- Retirar a fita.

- Aquecer a fita de agarose. (secador 1 a 2min)

4. Resultado

No final