Relatório Cromatografia

CENTRO UNIVERSITÁRIO UNIVATES

CURSO DE QUÍMICA INDUSTRIAL

Prof. Eduardo Miranda Ethur

CROMATOGRAFIA

Aplicação do método de cromatografia na comparação entre o padrão de β-caroteno extraído de folhas de espinafre e o β-caroteno do extrato de tomate.

Adriano Gennari

Rodolfo Frozza

Rodrigo Baseggio

Lajeado, junho de 2014

RESUMO

A cromatografia é um método físico-químico de separação. Ela está fundamentada na migração diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interações, entre duas fases imiscíveis, a fase móvel e a fase estacionária. A cromatografia pode ser utilizada para a identificação de compostos, por comparação com padrões previamente existentes. Neste trabalho foi realizado o isolamento de um padrão de β-caroteno em folhas de espinafre para posterior comparação com o β-caroteno do extrato de tomate através do método de cromatografia em camada delgada (CCD). Ao fim foi calculado o Rf (fator de retenção) das duas amostras, que é a razão entre a distância percorrida pela substância em questão e a distância percorrida pela fase móvel. O valor Rf é característico para cada composto e assim pode ser usado como método de identificação de substâncias. Os resultados obtidos foram os seguintes: Rf(Amostra)= 0,489 e Rf(Padrão)=0,634.

SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO .........................................................................................................3

1.1 Objetivos ..............................................................................................................6

2 MATERIAIS E MÉTODOS .......................................................................................7

2.1 Materiais Utilizados .............................................................................................7

2.2 Reagentes Utilizados ...........................................................................................8

2.3 Procedimento Experimental ...............................................................................9

3 RESULTADOS E DISCUSSÃO .............................................................................11

4 CONCLUSÕES ......................................................................................................14

5 REFERÊNCIAS ......................................................................................................15

1 INTRODUÇÃO

A cromatografia é definida como a separação de uma mistura de dois ou mais compostos por distribuição entre duas fases, uma das fases é estacionária e a outra é móvel. Dependendo a natureza das substâncias envolvidas, vários tipos de cromatografia podem ser possíveis, como por exemplo, métodos cromatográficos sólido-líquido (coluna, camada fina, papel), líquido-líquido (líquida com alta eficiência) e gás-líquido (com fase gás) são comuns.1,2

O princípio de extração com solventes é mais ou menos observado em todos os tipos de métodos cromatográficos, os métodos dependem das solubilidades ou das adsortividades diferenciais das substâncias a serem separadas em relação às duas fases entre as quais eles se particionam.2

A cromatografia em coluna é uma técnica de separação sólido-líquido que se baseia na adsorção e na solubilidade das amostras nos solventes. Este sólido pode ser praticamente qualquer material que não se dissolva na fase líquida. Os sólidos mais utilizados nesta técnica são a sílica gel, também chamada de ácido silícico, e a alumina neutra.2

Neste método esse este sólido finamente dividido é colocado em uma solução que contenha um composto orgânico, parte da substância adsorve-se ou adere-se nas partículas do sólido. O fluxo contínuo do solvente pela coluna elui, ou lava, os solutos da sílica (ou alumina) e os desloca para baixo na coluna. Os solutos são chamados de eluatos ou eluintes, e o solvente, de eluente. Conforme os solutos descem na coluna, estabelecem um novo equilíbrio e esse equilíbrio faz com que os compostos se movam na coluna em velocidades diferentes, ocasionando a separação dos componentes da mistura.1

No processo de cromatografia de coluna delgada, duas escolhas são fundamentais para uma boa separação: o tipo de adsorvente e o sistema de solventes. Os compostos apolares passam pela coluna com maior velocidade que os polares, pois tem uma afinidade menor com o adsorvente. Se um solvente muito polar é escolhido, todos os solutos, polares e apolares, serão lavados sem que ocorra separação. Por isso, adsorvente e solvente devem ser escolhidos de modo que nenhum deles seja favorecido em excesso na competição pelo equilíbrio das moléculas de soluto.1

Na cromatografia de coluna é muito comum começar a eluição com um solvente apolar, para remover os compostos relativamente pouco polares da coluna, e aumentar gradualmente a polaridade do solvente, para forçar uma separação dos compostos de maior polaridade da mistura.2

Outro método de cromatografia da partição de sólido-líquido é a Cromatografia de Camada Fina (CCF), nesta técnica, a fase líquida móvel não percola de cima para baixo. Ela é forçada a ascender uma camada fina de adsorvente que cobre um suporte de apoio, o suporte mais comum é um material plástico, mas outros materiais são usados. Um suporte coberto e seco é chamado de placa de camada fina. Quando uma placa de camada fina é colocada em um recipiente que contém uma pequena quantidade de solvente, este sobe pela placa devido à capilaridade. Quando o solvente sobe, a amostra se particiona entre a fase líquida, móvel, e a fase estacionária, sólida. Durante esse processo ocorre a separação