CONFECÇÃO DO ESFREGAÇO BACTERIANO E COLORAÇÃO DE GRAM

ESCOLA POLITÉCNICA DE BELO HORIZONTE

CONFECÇÃO DO ESFREGAÇO BACTERIANO E COLORAÇÃO DE GRAM

DISCIPLINA: MICRO BIOLOGIA

TURMA: TÉCNICO EM QUÍMICA / 1º MÓDULO

PROFESSORA: Cynthia Alessandro Bello

COMPONENTES DO GRUPO:

Isabela Moreira

Rodrigo Magalhães

Belo Horizonte - 26/10/2012

1 Objetivo:

Aprender a realizar a técnica do esfregaço bacteriano e método de coloração GRAM, para observação de micro organismos em microscópio.

2 Introdução:

O esfregaço se dar por acomodação de uma amostra a qual se deseja examinar, em uma lamina de vidro, procedendo o método de coloração GRAM que permite não só a visualização dos micro-organismos, bem como sua classificação em dois grupos distintos GRAM Positivos e GRAM Negativos.

3 Materiais Utilizados:

1. Placa de vidro

2. Alça de platina

3. Violeta

4. Lugol

5. Fucsina

6. Álcool

7. Água

8. Bico de Bunsen

9. Leite Fermentado

( Marca: Cotochés, Data de Fabricação: 05/06/2012, Data de Validade: Desconhecido, Lactobacilo Utilizado: Desconhecido)

4 Procedimento Experimental

Utilizando se de álcool 70°, esterilizou se toda a parte exterior da embalagem do leite fermentado. Mantendo o orifício da embalagem coberto com algodão embebido em álcool 70° ate a hora de coletar a amostra. Preparada a bancada devidamente para coletar a amostra, segue o processo de flambar os utensílios a serem utilizados. Flamba se a superfície da lamina de vidro a ser utilizada e já devidamente marcada a área de amostra, flamba se a alça de platina, por ultimo destampa se o frasco que contem a amostra a ser analisada e flamba se as bordas do mesmo. Utilizando se da alça de platina coleta se uma amostra do material, depositando a de forma concentrada zona marcada na lamina de vidro, deixa se secar ligeiramente, a seguir flamba se rapidamente a lamina para fixar o material na lamina. Reserva se a amostra, flamba se novamente a alça de platina afim de esteriliza la. Prepara se a bacada para proceder a coloração da lamina. Aplica se corante violeta sobre a zona de amostra seguido de lugol, álcool e fucsina respeitando se o tempo de pausa de cada agente. Feita a coloração reserva se a lamina para observação em microscópio. Apos o deposito da amostra na lamina flamba se rapidamente