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Questões para estudo III – SNC e SNA

Por:   •  13/5/2015  •  Trabalho acadêmico  •  3.947 Palavras (16 Páginas)  •  233 Visualizações

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RAYSSA BERNARDES ANDRADE

RELATÓRIO DE BACTERIOLOGIA

FRANCA

2015

COLORAÇÃO DE GRAM

INTRODUÇÃO

Coloração é a suspensão de células anexadas à lâmina como um filme, usualmente pelo calor. Os microbiologistas usam técnicas de coloração para mostrar as várias estruturas dos micro organismos, para identificar suas estruturas internas e para ajudar a identificar e separar micro organismos similares. É para a diferenciação de micro organismos através das cores para serem observados em microscopia ótica. Uma das principais técnicas é a coloração de Gram, sendo assim coradas e classificadas em: Gram-positivas (cristal violeta) e Gram-negativas (safranina). A razão da diferente coloração entre uma e outra está relacionada na espessura e estrutura de suas paredes celulares e também devido à sua resistência ao descoramento pelo álcool.

Preparação de esfregaço e coloração de Gram
As Gram-negativas possuem uma parede celular complexa e composta de peptideoglicano e se dividem em subgrupos conforme suas características morfológicas e fisiológicas, tais como motilidade e necessidade de oxigênio.

-OBJETIVO

Saber a preparar o esfregaço de bactérias e assim realizando a técnica de coloração de Gram,

-MATERIAIS

lâmina                                                          lugol
bico de bunsen                                             água
corante (fucsina e cristal violeta)                 álcool acetona
pipeta de Pasteur                                          microscópio óptico


-PROCEDIMENTO

Iniciamos com a fixação do esfregaço, passamos 3 vezes a lâmina no bico de bunsen logo cobrimos a lâmina com cristal violeta por 1 minuto, escorremos o excesso e cobrimos a lâmina com lugol, em seguida lavamos em água corrente, adicionamos a solução álcool-acetona para a descoração e novamente lavamos em água corrente, cobrimos com o corante fucsina durante 30 s e por fim lavamos em água, deixamos secar e observamos em microscopia otica com óleo de imersão para melhor visualização na objetiva de 100x.

-RESULTADOS

[pic 1]             

COLORAÇÃO DE ZIEHL-NEELSEN

Coloração de bactérias álcool-ácido resistentes (Ziehl-Neelsen)
É o método de coloração especial para bactérias ácido-resistentes, que se refere a bactérias capazes de resistir muitas substâncias químicas.


-OBJETIVO

Usado em laboratórios para o diagnóstico de micobacterioses
MATERIAIS

lâmina
corante (fucsina e azul de metileno)
álcool-ácido clorídrico

-PROCEDIMENTO

Fizemos um esfregaço  com a Mycobacterium e fixamos no calor, após coramos com o corante fucsina e em seguida aquecemos cuidadosamente a lâmina até emissão de vapores durante 5 min, escorremos o excesso do corante e diferenciamos com álcool-ácido clorídrico a 1%, lavamos com água corrente delicadamente, depois coramos novamente com o corante azul  de metileno por 30 s, lavamos com água corrente e deixamos a lâmina secar, observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.


-RESULTADO

Formação de bacilos rosa, encontra-se  bacilos corados em rosa

COLORAÇÃO DE PAREDE – MÉTODO DE ROBINOW

Coloração de Parede (Método Robinow)
A parede celular bacteriana é uma estrutura rígida que recobre a membrana citoplasmática e confere a forma de bactérias

-OBJETIVO

Observar e identificar a lâmina para chegar aos  resultados

-MATERIAIS

lâmina
solução ácido tônico
água

-PROCEDIMENTO

Fizemos um esfregaço em lâmina com o Bacillus Megaterium em seguida deixamos secar, mergulhamos a lâmina em solução de ácido tônico (sol. A) durante 20 min, lavamos em água corrente e deixamos secar e logo após observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.



                                    COLORAÇÃO FONTANA TRIBONDEAUX

3*Método  de impregnação pela prata de bactérias espiraladas  (Fontana- Tribondeaux)
Trata-se de uma técnica de  impreguinação pela prata

-OBJETIVO

-MATERIAIS

palito de dente            solução impregnadora (solução c)
lâmina                         líquido de rouge                        
água                             mordenças com solução b

-PROCEDIMENTO

Usamos um palito de dente e colhemos a amostra e fizemos um esfregaço em seguida deixamos secar e fixamos o esfregaço em líquido rouge durante um min, após lavamos cuidadosamente mordenças com solução b, aquecemos até emissão de vapor lavamos novamente em água corrente e destilada colorimos com solução impregnadora  (solução c)e aquecemos até emissão de vapor durante 30 s, lavamos e deixamos secar e assim observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.

COLORAÇÃO DE WIRTZ - CONKLIN

Coloração de esporos (Método de Wirtz- Conklin)
É uma célula de parede espessa,composta por peptideoglicano, a qual vai dar origem à parede da célula vegetativa, por ocasião da germinação é   muito resistente ao calor, á dessecação e outros agentes químicos e físicos, permanecendo latente por um longo período.

-OBJETIVO

Indagar e cumprir a coloração de esporos e compreender a princípio a técnica.


-MATERIAIS

lâmina                                                              água
bico de bunsen                                                 microscópio óptico                  
corante (verde malaquita e safranina)                      

-PROCEDIMENTO

Foi feito um esfregaço fino com Bacillus Megaterium, deixamos  secar e em seguida fixamos  a lâmina no calor, cobrimos o esfregaço com o corante verde malaquita e aquecemos a lâmina até desprendimento de vapor com 2 min, depois lavamos em água corrente e cobrimos o esfregaço com o corante safranina com 1 min e após lavamos em água corrente e logo deixamos secar e observamos em objetiva de imersão no aumento de 100x.


                                                   COLORAÇÃO METODO DE GINS

Coloração de Cápsula (método de Gins)
A cápsula é uma camada gelatinosa externa composta de polissacarídeos, glicoproteínas ou polipeptideos produzidas por algumas bactérias e que envolve a parede celular patogenicidade humana.

-OBJETIVO

Identificar a morfologia .

-MATERIAIS

lâmina                                                 crescimento de bactéria
corante (fucsina e eosina)                    
bico de bunsen  

-PROCEDIMENTO

Iniciamos com uma gota de corante fucsina a  1% na lâmina, misturamos uma alçada do crescimento de klebsiella  pneumoniae e sem espalhar a gota deixamos em reparo durante 30 s e após acrescentamos uma gota de corante eosina a 1% e homogenizamos 1 min, fizemos o esfregaço com o auxílio de outra lâmina e deixamos secar logo observamos em objetiva no óleo de imersão no aumento de 100x.


                                                         
SEMEADURA DE FEZES E URINA

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