Relatório de Prática Sobre Microbiologia

RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA 01: BIOQUIMICA HUMANA

TEMA DA AULA: PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS UTILIZADOS NA MICROBIOLOGIA CLASSIFICAÇÃO, COMPOSIÇÃO QUÍMICA E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURALOGIA

PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS UTILIZADOS NA MICROBIOLOGIA

1. Resumo sobre o tema.

Nessa prática refere-se à preparação e esterilização de materiais utilizados na microbiologia. A grande maioria dos materiais são vidrarias e necessitam serem esterilizados para posteriormente serem usadas adequadamente. Esse procedimento é importante pois através dela se consegue destruir microrganismos evitando assim a contaminação.

2. Materiais utilizados.

- Vidrarias: Placas de Petrin de 30, 90, e 120 mm, Pipetas Volumétricas de 1, 5, 10 e 20 ml, Balão de Fundo Chato e Erlenmeyer de 250 ml, Tubos de Ensaio.

- Materiais: Papel Kraft ou Papel Madeira

- Equipamentos: Autoclave e Estufa (Forno).

3. Responda as Perguntas

1. Dentre os procedimentos utilizados na preparação de materiais utilizados na microbiologia, qual a importância no tamponamento dos tubos de ensaio e dos Erlenmeyer com algodão hidrofóbico?

A importância de tampar os Erlenmeyer e os tubos de ensaio com algodão hidrofóbico é evitar a contaminação do conteúdo por microrganismos do meio ambiente, que podem afetar negativamente os resultados dos experimentos. O processo de tamponamento com algodão hidrofóbico evita a entrada de umidade no recipiente, por ser resistente à água, e filtra o ar que entra e sai dele ajudando a manter o ambiente dentro do recipiente o mais estéril possível. É importante trocar o algodão toda vez que for usá-lo para evitar contaminação cruzada.

2. Qual material é utilizado para embalagem dos materiais que serão submetidos a processos de esterilização via estufa ou autoclave?

Para fins didáticos foi utilizado o Papel Kraft para embalar as vidrarias, contudo não é a embalagem mais adequada para se utilizar em autoclaves e estufas, porque sua porosidade não é uniforme, o que pode causar a contaminação do material depois de esterilizado e porque solta fiapos durante o ciclo de esterilização, o que ao longo do tempo pode entupir a tubulação interna da autoclave, acionando seus sistemas de segurança.

O uso dentro do Papel Kraft em ambiente hospitalar foi proibido pela Anvisa, conforme RDC 15 de março de 2012.

Foi utilizado também Algodão Hidrofóbico para a confecção das rolhas para tampar o Balão de Fundo Chato, o Erlenmeyer e os Tubos de Ensaio. Para preparar esse material, corta-se o algodão com formato aproximado de um retângulo que é dobrado e enrolado para formar um cilindro. A rolha deve estar perfeitamente ajustada à boca do frasco com aproximadamente 1/3 para fora da boca do frasco.

3. Adicione uma ou mais fotos da preparação de materiais utilizados no laboratório de microbiologia?

CLASSIFICAÇÃO, COMPOSIÇÃO QUÍMICA E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA

1. Resumo sobre o tema abordado em aula.

O estudo dos microrganismos (fungos e bactérias) depende da aquisição de muitos microrganismos idênticos (culturas puras) que são obtidos em laboratório devido ao isolamento da população mista. Para isso, precisamos preparar meios de cultura estéreis e mantê-los em condições estéreis (livres de qualquer forma de vida). Para introduzimos o inóculo em meio estéril (quando semeamos e inoculamos), teremos cuidados técnicos necessários para evitar contaminação externa (ambiental) (Universidade Federal de Juiz de Fora – Roteiro de Aulas Práticas).

Conhecer e entender a composição e preparação dos meios de cultura e dos materiais formulados quimicamente, a delimitação e os componentes necessários para o crescimento microbiano, a fonte de carbono, a fonte de nitrogênio e de alguns outros elementos químicos é o objetivo da aula apresentada.

2. Materiais utilizados

- Vidrarias: Pipeta, Becker, bastão, tubos de ensaio, Erlenmeyer, vidro de relógio.

- Reagentes: Ágar de MacConkey, Nutriente Broth, Ágar Cled de Kasvi.

- Equipamentos: Estante para tubo de ensaio, pipetador, balança, água destilada e banho maria.

- Equipamento de Segurança: Luvas e máscara.

Obs.: O ágar é um polissacarídeo obtido de um grupo de algas (normalmente Gelidium spp.). No começo do século 20, o ágar tornou-se o agente solidificante de escolha ao invés da gelatina em meios de cultura para microbiologia, pois mantém sua firmeza em temperaturas necessárias para o crescimento de muitos patógenos e geralmente é mais resistente a degradação por enzimas bacterianas (P.F. = 95ºC).

3. Procedimento:

1º. Pesar 1,3 g do Nutriente Broth em um Vidro de relógio, transferir para um béquer e adicionar 100 ml de água aos poucos para fazer a dissolução do meio. Pipetar 10 ml da solução e transferir para um tubo de ensaio, repetir a operação para mais dois tubos de ensaio. Tampar todos os tubos com algodão hidrofóbico.

2º. Pesar 3,61 g de Ágar Cled de Kasvi em um Vidro de relógio, transferir para um Erlenmeyer e adicionar 100 ml de água aos poucos para fazer a dissolução do meio. Tampar o Erlenmeyer com algodão hidrofóbico. Cobrir o algodão com um pedaço de papel Kraft e prendê-lo com fita de autoclave para impedir que ele caia.

3º. Pesar 5,15 g de Ágar de MacConkey em um Vidro de relógio, transferir para um Erlenmeyer e adicionar 100 ml de água aos poucos para fazer a dissolução do meio. Tampar o Erlenmeyer com algodão hidrofóbico. Cobrir o algodão com um pedaço de papel Kraft e prendê-lo com fita de autoclave para impedir que ele caia.

4º. Levar todas os dois meios para a autoclave. Aguardar a autoclave aquecer até 121ºC e manter por 15 min.

4. Responda