Aula Prática de Cromatografia Gasosa

Universidade Federal de São Paulo

ICAQF - Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas[pic 1]

Disciplina de Análise Instrumental II - Farmácia

 

Aula Prática 02 – Cromatografia Gasosa

“Determinação das concentrações de parabenos em amostras de suplementos alimentares por cromatografia gasosa”

1. Introdução

        Os parabenos (metilparabeno (MeP), o etilparabeno (EtP), o propilparabeno (PrP), o butilparabeno (BuP) e o benzilparabeno (BzP)) são ésteres do ácido p-hidroxibenzóico amplamente utilizados como conservantes (antimicrobianos) em cosméticos, produtos farmacêuticos e alimentos. Atualmente, a exposição dos seres humanos a esta classe de compostos tem recebido considerável atenção de cientistas e órgãos regulamentadores de diversos países, devido aos seus potenciais efeitos adversos à saúde. Entretanto, no Brasil, os dados disponíveis sobre as fontes de exposição da população a esta classe de compostos ainda são escassos. Os suplementos alimentares são produtos com efeito nutricional ou fisiológico, destinados a complementar a dieta normal. Estes suplementos têm sido amplamente utilizados pela população e muitas vezes indiscriminadamente. Alguns suplementos disponíveis comercialmente podem apresentar desvios de qualidade, como a presença de contaminantes, além de níveis excessivos de substâncias permitidas, por exemplo, os parabenos. Portanto, a determinação das concentrações dos parabenos em suplementos alimentares é extremamente importante para uma avaliação de risco da exposição humana a esses compostos. Tendo em vista os possíveis efeitos tóxicos ocasionados pela a exposição aos parabenos à saúde humana, este são regulados em vários países, incluindo Brasil. Por exemplo, a Resolução da Diretoria Colegiada - RDC nº 239, de 26 de julho da Anvisa estabelece os aditivos alimentares autorizados para uso em suplementos alimentares, nas suas respectivas funções, limites máximos e condições de uso. Neste caso, somente o MeP e EtP são permitidos numa concentração máxima de 0,15%.

Tabela 1: Estrutura química e propriedades físico-químicas dos parabenos estudados.

	MeP	EtP	PrP	BuP	BzP
	[pic 2]	[pic 3]	[pic 4]	[pic 5]	[pic 6]
Peso molecular (g/mol)	152	166	180	194	228
pka	8,2	8,2	8,4	8,4	8,5
Solubilidade em água (g/100mL)	0,25	0,17	0,05	0,02	0.01
LogPow	2,0	2,5	3,0	3,6	3.6
Ponto de fusão	131	117	97	68	111
Ponto de ebulição	275	297	294	309	389

2. Objetivo

        Determinar a concentração de cinco parabenos (metil-, etil-, propil-, butil-, benzil-parabeno) em diferentes tipos de amostras de suplementos alimentares empregando cromatografia gasosa com detector de ionização em chama (CG-FID).

3. Procedimento experimental

Os seguintes padrões analíticos serão utilizados para determinação dos parabenos: MeP, EtP, PrP, BuP e BzP por CG-FID. O método de padronização externa (que compara a área da substância a ser quantificada na amostra com as áreas obtidas com soluções de concentrações conhecidas preparadas a partir de um padrão certificado) será utilizado para determinar as concentrações dos parabenos. O reagente derivatizante empregado será o N, O-bis(trimetilsilil)trifluoroacetamida (BSTFA) com 1% trimetilclorosilano (TMCS).

3.1. Instrumentação

Tabela 2: Condições instrumentais

Instrumento
GC-FID	TRACE® 1300 – Thermo Scientific®
Coluna	SLB®-5ms
Dimensões	30 m (comprimento) x 0,25 mm (di)
Material	Sílica fundida
Fase Estacionária Líquida	5% difenil/95% dimetilpolissiloxano
Espessura do Filme	0,25 µm
Temperatura da Coluna	Ver abaixo as alternativas (A, B e C)
Gás de arraste	Nitrogênio (N2)
Vazão do gás de arraste	1 mL/min
Temperatura do injetor	250 oC
Modo de injeção	Splitless
Volume de injeção	1,0 µL
Detector	Ionização em Chama
Temperatura do detector	300 °C