CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS.
Por: sblccs • 16/9/2017 • Relatório de pesquisa • 1.354 Palavras (6 Páginas) • 382 Visualizações
ESTADO DE MATO GROSSO[pic 1][pic 2]
SECRETARIA DE ESTADO DE CIÊNCIA E TECNOLOGIA
UNIVERSIDADE DO ESTADO DE MATO GROSSO
CAMPUS UNIVERSITÁRIO DE CÁCERES
CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS.
Cleidiane cistina da silva
Aula Pratica
Relatório de todas as aulas práticas realizadas durante o primeiro semestre de 2017 apresentado á disciplina de Microbiologia Básica,ministrada pela Professora. Alessandra Morini.
JULHO DE 2017[pic 3]
Sumário
Introdução 3
Objetivo 3
Métodos 4
Resultados 5
Introdução 6
Matérias 6
Objetivo 7
Métodos 7
Resultados 8
Referencia 8
[pic 4][pic 5]
Introdução
A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com o reagente cristal violeta, lugol, álcool-acetona e fucsina básica. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas. A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias.
A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos. Essa informação permite ao clínico monitorar a infecção até que dados de cultura estejam disponíveis. É possível a análise de vários esfregaços por lâmina, o que facilita a comparação de espécimes clínicos. As lâminas podem ser montadas de forma permanente e preservadas como documentação. A partir do advento da microscopia eletrônica e do aperfeiçoamento das técnicas de análise bioquímica dos diferentes componentes celulares, foi verificado que esta diferença entre as bactérias Gram positivas e Gram negativas era, provavelmente, devida às diferenças de composição e estrutura das paredes celulares.
Assim, quando observadas sob microscopia eletrônica de transmissão, as bactérias Gram positivas apresentam uma parede celular espessa (de 20 a 80 nm), de aspecto homogêneo, enquanto as células Gram negativas exibem uma parede mais delgada (de 9 a 20 nm) e de aspecto bastante complexo, aparentemente apresentando mais de uma camada.
Objetivo
Confeccionar uma lâmina e utilizar a técnica de gram tanto positiva como a negativa para visualizar a morfologia das bactérias ao microscópio óptico.
Materiais
- Lamina;
- Proveta 250ml
- Erlemeyer
- Bico de Bunsen;
- Espátula de inox;
- Papel filtro;
- Peseta com álcool 70%
- Balança analítica;
- Estufa;
- Béquer;
- Pera;
- Pipeta sorológica;
- Tubo de duram;
- Papel alumínio dobrado ao meio;
- Placa de petri;
- Microscópico
- Autoclave
Meio de cultura preparados somente 100 ml
- Ágar verde brilhante (AVB)-5,81para cada 100ml de agua destilada
- Mac conkey Agar(MVA) - 5,16 gramas para cada100 ml de agua destilada
- Caldo Verde brilhante (VB)- 4 gramas para cada100 ml de agua destilada
- Potato dextrose Ágar (PDA)- 3,9 gramas para cada 100ml de agua destilada.
Métodos
- Esterilizar na autoclave todos os materiais onde o meio de cultura foi preparado para que não haja contaminação;
- Pesar os meios de cultura na balança de precisão tem que ser a quantia exata;
- Limpara a balança com o álcool 70%;
- Depois de medida o meio de cultura é misturado juntamente com a água destilada;
- Levar o meio de cultura que foi preparado e colocado no erlemeyer para a autoclave;
- A autoclave tem que está na temperatura ideal que é de 121ºC, tem que está com agua no seu interior na medida correta, esperar entorno de 15 a 30 minutos;
- Retirar o meio de cultura de dentro da autoclave e colocar algumas amostra na placa de petri e outras no tubo de ensaio (caldo verde brilhante);
- Levar para a estufa para acompanha o crescimento desse meio de cultura preparado;
Resultados
Com a preparação dos meios de cultura foi possível observar que as amostra que ficaram no tubo de duram que era do caldo verde brilhante dos 5 tubos de duram 2 tinha a presença de uma bolha gás, que pode ser a confirmação de caliciformes mais para ter certeza tem que fazer mais estudos específicos para ter essa confirmação. Nas laminas preparadas através desses meios de cultura onde para abrir o erlemeyer tem procedimentos que devem ser respeitado, sempre abrir próximo ao bico de Bunsen para não contaminar as amostra, depois da lamina pronta observado no microscópico onde observamos que o método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta no citoplasma durante um tratamento com álcool-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem.
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