Roteiro Pesquisa de alcalóides e metilxantinas

Aula 11

11. Pesquisa de Alcalóides

11.1. Teste preliminar

Em Becker, ferver por 3 minutos, cerca de 5 g da droga vegetal (pulverizada)

com 50 mL de HCl 2N. filtrar por algodão. Dividir o filtrado em 4 tubos de ensaio.

Esfriar.

Tubo 1: Branco (contém apenas o extrato)

Tubo 2: acrescentar 3 gotas do reagente de Dragendorff

Tubo 3: acrescentar 3 gotas do reagente de Mayer

Tubo 4: acrescentar 3 gotas do reagente de Bertrand

Deixar em repouso e observar a formação de turvação ou precipitado

11.2. Teste decisivo

Aquecer à fervura, cerca de 5 g da droga vegetal, grosseiramente pulverizada e

50 ml de HCl 2N. Deixar esfriar a temperatura ambiente e filtrar. Alcalinizar o meio

com amônia diluída (40%) e verificar o pH com papel indicador – pH: 8-9. Transferir o

filtrado para um funil de separação. Acrescentar cerca de 50 mL de clorofómio. Agitar

por inversão, abrindo a torneira para a saída dos gases. Separar a fração que contém o

alcalóide. Ainda no funil, acrescentar 20-40 mL de HCl 2N e agitar. Separar a fração

salificada aquosa ácida em 4 tubos de ensaio em quantidades equivalentes. Esfriar.

Tubo 1: Branco (contém apenas o extrato)

Tubo 2: acrescentar 3 gotas do reagente de Dragendorff

Tubo 3: acrescentar 3 gotas do reagente de Mayer

Tubo 4: acrescentar 3 gotas do reagente de Bertrand

A formação de turvação e/ou precipitação indica a presença de alcalóides.

Drogas Vegetais:

Atropa belladona (folhas): Beladona

Peumus boldus (folhas): Boldo-do-Chile

Pilocarpus jaborandi (folhas): Jaborandi

Strichnos nux-vomica (sementes): noz vômica

Cephaelis ipecacuanha (raiz): ipeca

11.2. Identificação de Metilxantinas – Perfil Fitoquímico Qualitativo

11.2.1. Extração e Isolamento da Fração Cafeínica

Ferver por 2 min. 1 g da droga vegetal pulverizada com 5 mL de ácido sulfúrico

10% e 5 mL de água. Filtrar em papel de filtro previamente umedecido na mistura águaácido

sulfúrico. Alcalinizar cerca de 5 mL do filtrado com hidróxido de amônia diluído.

Confirme com papel indicador. Transferir o filtrado alcalinizado para o funil de

separação e acrescentar 5 mL de clorofórmio. Agitar segundo a técnica. Decantar o

clorofórmio. Transferir a porção clorofórmica para cápsula de porcelana com cabo e

levar a chapa-quente (ou banho-maria) para evaporar.

11.2.2. Identificação pela Reação de Murexida

Ao resíduo clorofórmico, frio, na cápsula de porcelana acrescentar 3 gotas de

ácido clorídrico 6 N e 2 gotas de peróxido de hidrogênio concentrado. Homogeneizar.

Evaporar a mistura em chapa-quente: deve formar um resíduo corado de

vermelho.

Juntar ao resíduo de evaporação previamente resfriado algumas gotas de

hidróxido de amônio 6 N: o líquido deverá adquirir cor violeta carregada.

11.2.3. Identificação por Cromatografia em Camada Delgada Comparativa

Avaliar qualitativamente o perfil de drogas vegetais contendo metilxantinas,

através da comparação da droga teste com o padrão (substância ativa ou marcador), de

acordo com o Rf, cor e comportamento frente aos reveladores.

11.2.3.1. Preparo da amostra 1 (uma solução para todos)

Pesar 10 g de pó de guaraná. Adicionar 100 mL de etanol 96º. Preceder a

extração por turbólise com 1 min. de agitação. Filtrar por algodão e depois por papel de