Esse relatório tem como objetivo a construção da curva de peso seco referente ao Lactobacillus casei no meio MRS.

1. Objetivo

Esse relatório tem como objetivo a construção da curva de peso seco referente ao Lactobacillus casei no meio MRS.

2. Metodologia

Após isolamento e caracterização dos microrganismos, nomeados como Lula e Pezão, a partir de leite fermentado comercial, foram feitos cultivos de ambos. Foram transferidas alçadas cheias para um Erlenmeyer contendo meio MRS autoclavados, os mesmos foram incubados a 37ºC a para que se possa obter um bom crescimento.

A partir do meio desenvolvido, foram feitas diluições de 100, 50, 25, 20 e 15 vezes. Foram medidas as absorbâncias das soluções diluídas para obter valores de densidade óptica, correspondentes a cada concentração.

Os meios também foram filtrados para determinar a massa celular contida nas alíquotas de volume conhecido. Com uma pipeta volumétrica, foram retirados 30 mL do meio crescido e homogeneizado. As alíquotas foram filtradas utilizando membranas de 0,2 μm de diâmetro de poro. Após a filtração, as membranas foram colocadas em recipientes de massa conhecida. Os recipientes foram secos até peso constante, através de infravermelho.

Determinada a concentração de cada microrganismo e as respectivas absorbâncias, foi construída uma curva de peso seco Abs (570 nm) x Concentração celular (g PS/L) e determinado o fator de conversão de absorbância em concentração celular.

3. Resultados e Discussão

Através das pesagens, foram obtidas as massas de célula do “Lula” e “Pezão”, e posteriormente, a concentração celular.

Nas tabelas 1 e 2 estão os valores das pesagens dos dois microrganismos já citados.

Tabela 1 – Determinação do peso seco do L. casei “Lula”.

Sua concentração é dada por:

C (g/L) = m (g) /V (L)

C (g/L) = 0,04733 g/ 0,03000 L

C (g/L) = 1,578 g/L

Tabela 2 – Determinação do peso seco do L. casei “Lula”

E sua concentração é dada por:

C (g/L) = m (g) /V (L)

C (g/L) = 0,0465 g/ 0,03000 L

C (g/L) = 1,550 g/L

O valor negativo não foi considerado na média. Provavelmente, ocorreu um erro de manuseio durante a pesagem.

Através das medidas de densidade óptica de cada solução, foram obtidos os seguintes valores de absorbância para o Lula e Pezão, respectivamente:

Tabela 3 – Medidas de Absorvância do L. casei “Lula”, em 570 nm de comprimento de onda.

 Tabela 4 – Medidas de Absorvância do L. casei “Pezão”, em 570 nm de comprimento de onda.

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