Técnicas Copro-parasitológicas para Detenção de Protozoários

Técnicas Coproparasitológicas para detenção de protozoários – Faust e Sheater

8.1 Método de Faust.
A-) Objetivo:
Pesquisa principalmente de cistos de Giardia.

B-) Princípio: Centrífugo flutuação em solução de sulfato de zinco a 33%.

C-) Técnica:
Pegar 1 g de fezes e homogeneizar em 10 ml de água, coar para outro copo. Colocar a suspensão no falcon, e centrifugar 3 x, a 2500 rpm durante 1 minuto, sempre descartar o sobrenadante entre uma centrifugação e outra; até a suspensão ficar clara, homogeneizar tudo com sulfato de zinco, até uns 10 ml, centrifugar por 1 minuto a 2500 rpm, deixar o tubo em repouso por 5 minutos.  Depois coletar 1 gota do sobrenadante com alça bacteriológica, colocar em uma lâmina e corar com 1 gota de lugol; observar no microscópio em aumento de 100 x.

8.2 Método de Sheather:

A-) Objetivos: Pesquisa de ovos de helmintos e principalmente oocistos de protozoários (método qualitativo de concentração).

B-) Princípio: Centrífugo flutuação em solução saturada de açúcar.

C-) Material:
1 g de fezes.
Solução B de açúcar [3 partes de A ( solução A consta de 1 kg de açúcar para 781,25 ml de água) e 1 parte de água].
2 copos.
Coador (tamis)
Espátula.
Tubo de centrífuga (falcon de 15 ml) e centrífuga.
Alça bacteriológica.
Lâminas e lamínulas pequenas.

D-) Técnica: Utilizar 11 ml de solução B (guardada na geladeira), vai homogeneizando aos poucos naqueles 1 g de fezes, em seguida, coar com tamis para outro copo, preencher novamente o falcon, equilibrar na balança e levar até a centrífuga; centrifugar por 10 minutos a 1600 rpm.  Flambar a alça bacteriológica, esfriar na água, pegar uma gota da flutuação e pingar na lâmina e depois cobrir com lamínula em cima, e levar ao microscópio para leitura de 100x, para Cryptosporidium spp 400x.
 

9. Técnicas Coproparasitológicas para detecção de Helmintos – Willis e Hoffman

9.1 Método de Willis Moolay.
A-) Objetivo: Pesquisa de ovos de helmintos e oocistos de protozoários. (Método qualitativo de concentração de ovos, principalmente para cães e gatos).

B-) Princípio: Flutuação simples, utilizando solução saturada de cloreto de sódio.

C-) Material:
Aproximadamente 3 gramas de fezes.
Solução hipersaturada de cloreto de sódio (35%, sendo 350g de sal para 1 litro de água).- Usar 40 ml aproximadamente.
Dois copos.
Coador.
Bastão de vidro.
Borel.
Placa de petri.
Lâmina e lamínula.

D-) Técnica:  Homogeneizar a amostra de fezes.  Misturar a solução saturada de sal nos 3 g de fezes aos poucos, em seguida, coar a suspensão passando para outro copo.  Colocar o borel sobre a placa de petri e preenche-lo com a suspensão de fezes coado, até formar um menisco convexo na borda do borel. Colocar a lamínula sobre o menisco, com cuidado para não formar bolhas, deixar em repouso de 10 a 15 minutos.  Arrastar a lamínula para cima da lâmina e levar ao microscópio, 100x de leitura.
 

9.2 Técnica de Hoffman:
A-) Objetivo: Pesquisa de ovos de trematódeos principalmente.

B-) Princípio: Sedimentação simples.

C-) Técnica: Pegar 5 a 10g de fezes, e homogeneizar com 250 a 300 ml de água; filtrar a suspensão de fezes para um cálice de sedimentação. Após cerca de 25 minutos, desprezar 2/3 do sobrenadante e acrescentar água até a boca do cálice; após uns 25 minutos, repetir o procedimento, até ficar bem limpo.  Pipetar o sedimento para uma lâmina, cobrir com lamínula e observar no microscópio com aumento de 40x.