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Cinética do escurecimeno não-enzimático com soluções modelo de açúcares e aminoácidos em pH neutro e ácido

Por:   •  19/5/2019  •  Relatório de pesquisa  •  441 Palavras (2 Páginas)  •  266 Visualizações

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1. Objetivo

Usando o método da turbidimetria, tem-se o objetivo de acompanhar e observar p crescimento celular Saccharomyces serevisiae em meio sintético.

2. Materiais e Reagentes

- Erlenmeyer de 500 mL

- Rolhas de algodão cardado

- Tubo de ensaio

- Pesa filtro

- Pipetas estéreis de 1 e 2 mL

- Espectrofotômetro (570nm)

- Sacarose

- Sulfato de amônio

- Fosfato de potássio monobásico

- Sulfato de magnésio heptahidratado

- Extrato de levedura

- Fermento de panificação Saccharomycescerevisiae

3. Metodologia

Adicionou-se assepticamente fermento de panificação ao frasco erlenmeyer com 100Ml de meio sintético para determinação da curVa de crescimento, devidamente estéril , buscando obter uma concentração de 0,2g/100mL.

Após, oito tubos foram separados e numerados de 0 a 7 (número referente às horas) e, a partir do momento em que o meio foi inoculado e após cada hora corrida, foram retiradas amostras assepticamente, efetuando as devidas diluições e lendo-as no espectrofotômetro a 570nm. A tabela abaixo exemplifica o processo descrito:

Tempo

Hora

Diluição

0hr

14:00

1:4 (1ml amostra + 3ml H2O)

1hr

15:00

1:4 (1ml amostra + 3ml H2O)

2hrs

16:00

1:10 (1ml amostra + 9ml H2O)

3hrs

17:00

1:10 (1ml amostra + 9ml H2O)

4hrs

18:00

1:10(1ml amostra + 9ml H2O)

5hrs

19:00

1:10 (1ml amostra + 9ml H2O)

6hrs

20:00

1:20 (1ml amostra + 19ml H2O)

7hrs

21:00

1:20 (1ml amostra + 19ml H2O)

4.  Resultados e discussão:

Com a utilização do coeficiente angular da curva-padrão feita na pratica de quantificação celular(Y=34,3X + 0,044) foi calculada a concentração da levedura através da equação e em seguida multiplicado pelo fator de diluição (FD) empregado em cada leitura:

Tempo

Hora

Diluição

Volume de H2O concentrado

Absorbância

Concentração

(Mg%)

0

14:00

1:4

3 mL

0,195

4,040x10^-3(x 4) = 0,017

1

15:00

1:4

3 mL

0,376

9,68x10^-3(x4) = 0,039

2

16:00

1:10

9 mL

0,349

8,89 x10^-3(x10) = 0,088

3

17:00

1:10

9 mL

0,532

0,014 x10=

0,142

4

18:00

1:10

9 mL

0,622

0,0168x10=

0,168

5

19:00

1:10

9 mL

0,727

0,019x10=

0,199

6

20:00

1:20

19 mL

0,395

0,010x20=

0,204

7

21:00

1:20

19 mL

0,466

0,012x20=

0,246

...

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