DOSAGEM DE GLICOSE

Título: Dosagem de glicose.

Introdução: Glicose é a principal fonte de carboidrato do organismo e sua concentração esta ligada a ação da insulina, a glicose é o carboidrato de maior importância da biologia. O organismo transforma todo carboidrato em glicose. Os glicídios são macromoléculas bioquímicas que desempenham as mais diversas funções, como reserva de energia, funções estruturais, podem ser co-fatores enzimáticos, carreadores de elétrons, pigmentos, emulsificantes e mensageiros intracelulares, além de regularem funções hormonais. Os carboidratos, também chamados de açúcares, abrangem um dos maiores grupos de compostos orgânicos conhecidos na natureza, e juntamente com as proteínas formam os principais constituintes dos organismos vivos, além de servirem, assim como os glicídios, de fonte de energia, estando maior abundância, para o homem. Apresentam estrutura de aldeídos ou cetonas com hidroxilas ligadas aos carbonos ao longo da molécula. Estes, quando presentes nas células, geralmente se associam à outras moléculas, como lipídios ou proteínas, formando glico conjugados. Além disso, em alguns carboidratos é possível encontrar nitrogênio, fósforo ou enxofre na composição. A glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidação da glicose para ácido glicônico e peróxido de hidrogenio. Através de uma reação oxidativa de acoplamento catalisada pela peroxidase (POD), o peróxido de hidrogenio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, formando um complexo de cor vermelha (quinoneimina), cuja absorbância medida em 500 nm, é diretamente proporcional à concentração de glicose na amostra.

Objetivo: Quantificar a concentração de glicose nas amostras analisadas.

Material

*Papel higiênico

*Etiqueta

*Termometro

*Banho Maria

*Ponteira

*Cubeta

*Espectrofotômetro

*Tubo de ensaio

*Pipeta volumétrica

*Pipeta automática

*Estante para tubo

*Qulitrol – soro sintético = sangue humano

*Reagente enzimático

Métodos

*Identificar os tubos de ensaio como:

Amostra 1    Amostra 2   Amostra 3    Padrão   Branco

*Com auxilio da pipeta, pipetar 2 ml de reagente enzimático para glicose e adicionar em todos os tubos.

*Com o pipetador automático e a ponteira adicionar as amostras nos tubos:

Amostra 1, no tubo 1

Amostra 2, no tubo 2

Amostra 3, no tubo 3

*No tubo de ensaio identificado como padrão adicionar 0,02 de glicose liquiform.

*Levar os tubos de ensaio para o banho Maria, deixar por 15 minutos em temperatura de 37°C

*Utilizar o termômetro para acompanhar a temperatura da água do banho Maria.

*Após os 15 minutos, deixar as amostras esfriar.

*Fazer a leitura no espectrofotômetro (Absorbância 505 nm).

*Colocar o branco na cubeta, secar com papel higiênico, colocar no espectro e zerar.

*Fazer a mesma coisa com o padrão, amostra1, amostra 2, amostra 3 e fazer a leitura, e anotar.

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