Extração de DNA da Cebola
Por: Laura Dieguez • 23/9/2018 • Relatório de pesquisa • 1.243 Palavras (5 Páginas) • 1.975 Visualizações
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Curso técnico em biotecnologia
Daniel cavalcante
laura christina dieguez passos bussulo
Milena valles
Extração de DNA da cebola
Bioquímica
Gabriele Freiria
[pic 3]
Londrina-PR
2018
SUMÁRIO
1 INTRODUÇÃO 2
2 OBJETIVO 3
3 MATERIAL E MÉTODOS 4
3.1 Material 4
3.2 Métodos 4
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO 5
5 CONCLUSÃO 7
1 INTRODUÇÃO
Até meados do século XX, o suporte físico da informação necessária para o desenvolvimento de um ser vivo era desconhecido. Entretanto em 1950, James Watson e Francis Crick elucidaram a estrutura molecular detalhada do DNA que contém as informações básicas que coordenam o desenvolvimento e funcionamento de todos os seres vivos e alguns vírus. Os segmentos de DNA responsáveis por carregar a informação genética são denominados genes. O restante da sequência de DNA tem importância estrutural ou está envolvido na regulação do uso da informação genética. (Griffiths et al. 2013).
O estudo do DNA é importante para a identificação de doenças, além de proporcionar modificações com a finalidade de adaptação das espécies a
determinados fatores, possibilitando aos vegetais uma maior produtividade. (Junqueira & Carneiro. 2005)
Durante a evolução da célula formou-se uma molécula, que hoje sabemos ser o ácido desoxirribonucleico (DNA), uma molécula longa, constituída por uma sequência de nucleotídeos, que por sua vez é formado por três diferentes tipos de moléculas, um açúcar (pentose), um grupo fosfato e uma base nitrogenada que pode ser púrica ou pirimídicas.As bases púricas encontradas no DNA são adenina e guanina; e as bases pirimídicas são citosina e timina, sendo que a adenina liga-se à timina e a guanina liga-se à citosina através de pontes de hidrogênio.
A molécula de DNA consiste em duas cadeias de nucleotídeos dispostas em hélice em torno de um eixo. As bases púricas e pirimídicas de cada cadeia polinucleotídica situam-se dentro da hélice dupla, em planos paralelos entre si e perpendiculares ao eixo da hélice (JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2005).
A extração de ácidos nucléicos (DNA e/ou RNA) geralmente é a primeira de várias etapas para o estudo da biologia molecular de qualquer organismo.
A primeira etapa envolve a ruptura ou análise das células; a segunda etapa consiste na desnaturação ou inativação de proteínas. Ácidos nucléicos podem, então, ser separados de macromoléculas através de solubilização em solventes orgânicos, seguida de precipitação por resfriamento.
A partir do mesmo, é possível, por meio de diferentes métodos, identificar genes e fazer o sequenciamento de nucleotídeos que compõem esse DNA.
O experimento tem o objetivo de extrair o DNA da cebola (Allium cepa) que é visualizado a olho nu, demonstrando assim experimentalmente a extração de ácidos nucleicos, e dessa forma, aplicando os conhecimentos adquiridos em aula sobre o DNA.
3 MATERIAL E MÉTODOs
3.1 Material
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3.2 Métodos
Inicialmente foi picado 250 g de cebola em pequenos pedaços (média de 5 mm). Logo após foi pesado 3 g de cloreto de sódio (Na Cl) e misturou-se a 10 ml de detergente que foram medidos na proveta de 50 ml. Foi completado com água até obter 100 ml de solução.
Seguidamente foi agitado delicadamente para não obter espumas. Juntou-se a solução com a cebola e foi levado até o banho Maria a 60 °C por 15 minutos. Após foi colocado o béquer com a solução num balde com gelo, por 5 minutos.
Feito isso foi agitado novamente e foi coado a mistura em uma peneira com papel filtro, sendo assim excluído o material sólido e colocado o material líquido em outro béquer limpo. Lentamente, foi inserido 100 ml de etanol 95%. Observou-se a precipitação do DNA.
4 RESULTADOS E DISCUSSÃO
Foi possível observar na experiência 3 camadas diferentes: houve a formação de duas fases, um inferior aquoso e a superior alcoólica. É possível a observação do DNA (emaranhado), que se apresenta por filamentos esbranquiçados, como observado na Figura 1.
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