Relatório bioquímica titulação de aminoácido

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA[pic 1]

INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE

DISCIPLINA: BIOQUÍMICA – ICSA13

TITULAÇÃO DE AMINOÁCIDOS

1.INTRODUÇÃO

Os aminoácidos possuem pelo menos dois grupos ionizáveis, que podem existir na forma protonada ( – COOH, – NH3+ ) ou desprotonada (– COOH-, – NH2), dependendo do pH do meio em que se encontra.

Em soluções muito ácidas, os dois grupos apresentam-se protonados (a); em pH muito alcalino, ambos apresentam-se desprotonados (c); e, em soluções próximas da neutralidade ou na forma cristalina, o aminoácido apresenta-se como um íon dipolar (b).

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A conversão entre as formas a,b e c em função do pH do meio é refletida na curva de titulação do aminoácido. Quando o aminoácido tem apenas dois grupos ionizáveis, como a alanina, sua curva de titulação (Fig. 1) assemelha-se às curvas de titulação de dois ácidos fracos com valores de pKa muito diferentes, como, por exemplo, um ácido carboxílico e uma amina primária. Esta semelhança é resultado da presença do grupo carboxila e do grupo amino na mesma molécula: o aminoácido.  As duas regiões de tamponamento presentes na curva correspondem à ionização do grupo carboxila (conversão da forma a em b) e do grupo amino (conversão de b em c), com valores de pKa de 2,35 e 9,87, respectivamente.

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2. OBJETIVO

• Determinar o pKCOOH, pKNH3 e o pI do aminoácido glicina;
• Traçar uma curva de titulação deste aminoácido;
• Relacionar o assunto teórico sobre aminoácidos com experimentos realizados na prática;
• Evidenciar na prática a característica anfótera do aminoácido.

3. MATERIAIS E MÉTODOS

3.1 Materiais

• Solução de glicina 1%;
• Indicador universal de pH,
• NaOH  0,5N
• HCl 0,5N

3.2 Métodos

• Foi transferida uma alíquota de 10 mL da solução de glicina para um erlenmeyer.
• Adicionou-se 2 gotas de indicador universal de pH.
• Adicionou-se, utilizando pipeta, frações de 1,0 mL da solução de NaOH  0,5 N.
• Após a adição da fração, agitar o frasco e aguardar cerca de 20 segundos.
• Comparou-se o pH utilizando escala, anotando o resultado.
• Repetiu-se a adição de NaOH 0,5 N, até a adição de 8,0 mL de NaOH  0,5 N.
• Calculou-se o pH e o ponto isoelétrico do aminoácido.
• Repetiu-se o procedimento, realizando a solução de HCl 0,5 N como titulante.

4. RESULTADOS E DISCUSSÃO

4.1 Resultados

A partir da titulação da glicina 1% com o NaOH foi obtida a seguinte tabela de valores:

Curva de titulação da glicina com NaOH 0,5 N
Equivalentes de OH-	Variação de pH
0	7
0,005	8
0,010	8
0,015	8
0,020	8
0,025	8
0,030	8
0,035	8
0,040	8
0,045	8
0,050	9
0,055	9
0,060	9

Tabela 1

A partir desses dados de adição de NaOH versus variação de pH, foi possível construir a curva de titulação da glicina em meio básico:

[pic 5]

Através da análise do gráfico, pode-se inferir que o pKNH2 é equivalente ao pH=8.

Em seguida foi efetuada a titulação com o HCl 0,5 N. Obteve-se então os seguintes dados:

Curva de titulação da glicina com HCl 0,5 N
Equivalentes de H+	Variação de pH
0	7
0,005	3
0,010	3
0,015	3
0,020	3
0,025	3
0,030	3
0,035	3
0,040	3
0,045	3
0,050	2
0,055	2
0,060	2

Tabela 2

Através desses dados, foi possível efetuar a curva de titulação da glicina em meio ácido:

[pic 6]

Por meio da análise do gráfico, pode-se inferir que o pKCOOH é equivalente ao pH = 3.

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