TESTE TETRAZOL DE SEMENTES

Cortar longitudinalmente sementes secas e imersas por 48h em água destilada. Colocar 2 metades de sementes em cada tubo de ensaio. Cada tubo corresponderá a uma repetição. Cada tratamento terá 4 repetições (4 tubos). Colocar 2 mL da solução tampão de fosfato em cada tubo de ensaio e levar à estufa a 40 ºC. Após o tempo de imersão, retirar as sementes do tubo e observá-las

Colocou-se os grãos de milho pra ferver com o auxilio de uma lamparina por 10 (dez) minutos;

Depois de fervido, partiu-os ao meio (os grãos), e colocou-os numa placa de petri;

Em outra placa foram colocados grãos de milho somente, embebidos em água pelo tempo recomendado, e cortados ao meio.

ESTE DO TETRAZÓLIO EM SEMENTES

AULA PRÁTICA Nº 13

TESTE DO TETRAZÓLIO EM SEMENTES

1. Introdução

O teste de tetrazólio baseia-se na atividade das enzimas desidrogenases (AOSA, 1983; Bulat, 1961; Copeland et al, 1959; Moore, 1973; Smith, 1952; Smith e Throneberry, 1951) as quais catalizam as reações respiratórias nas mitocôndrias, durante a glicólise e o ciclo de Krebs. Estas enzimas, particularmente a desidrogenase do ácido málico, reduzem o sal de tetrazólio (2,3,5-trifenil cloreto de tetrazólio ou TCT) nos tecidos vivos. Quando a semente é imersa na solução incolor de TCT, esta é difundida através dos tecidos, ocorrendo nas células vivas a reação de redução que resulta na formação de um composto vermelho, estável e não-difusível, conhecido por trifenilformazan.

2. Objetivo

Determinar a ocorrência e a localização da atividade de desidrogenases de sementes.

3. Material

Grão de milho embebidos por 12 a 24 horas;

Solução de TTC a 1% (Cloreto de Tetrazólio);

Banho-maria fervente;

Tubos de penicilina;

Lamina de barbear;

Pinça;

Lamparina;

Placa de petri.