LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA

UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA

LABORATÓRIO DE BIOQUÍMICA                                    

Reações de caracterização de aminoácidos e proteínas.

Prática: Profª Maria S.B.R. Figueiredo                Data: 23-08-18.
Aluna: Laryssa Rafaella Capistrano            Matrícula: 18101861

Introdução: Aminoácido é uma molécula orgânica formada por átomos de carbono, hidrogênio, oxigênio, e nitrogênio unidos de forma característica. Os aminoácidos são divididos em grupos: o grupo amina, grupo carboxílico, hidrogênio, carbono alfa e um radical característico de cada aminoácido.
Os aminoácidos se unem através de ligações peptídicas, formando as proteínas. As proteínas podem ser classificadas como estruturais,  estruturas de suporte que fornecem proteção ou resistência, o colágeno e a queratina são proteínas estruturais, em transportadoras, de defesa, em nutrientes tendo a ovoalbumina e a caseína. Os aminoácidos podem ser classificados quanto às características químicas de seus radicais. Apesar de existir variações dessa classificação, as mais simples enquadram os radicais dos aminoácidos em 4 grupos: Apolares, polares não carregados, polares carregados positivamente e polares carregados negativamente.

Objetivos:
- Caracterizar a presença de grupos amino através da reação da ninidrina;
- Caracterizar a presença de proteínas e/ou peptídeos contendo 3 ou mais aminoácidos;
- Demonstrar a solubilidade das proteínas em função do pH do meio.

RELATÓRIO

1. Com base no fundamento das reações de Ninidrina e Biureto, sugerir que tipo de substância existe nas amostras 1 e 2.

Resposta: Amostra 1 (leite) apresenta várias proteínas em sua composição. Também apresenta aminas livres;
A reação de Ninidrina é usada para verificar a presença de aminas, dando positivo para proteínas, peptídeos, aminoácidos, aminas primárias e amônia. Aquecendo a solução e adicionando a Ninidrina forma-se uma coloração azulada por causa da reação com os aminoácidos presentes.
Já na reação com Biureto, ocorre a identificação de proteínas. Ao adicionar a amostra 1 observa-se coloração violeta, que ocorre quando há no mínimo três amoniácidos.

1. Explicar a precipitação da ovoalbumina em presença de TCA e HgCl2.

Resposta: Esse reagente caracteriza a desnaturação, provoca a perda da conformação tridimensional da proteína de forma irreversível. Consequentemente, a proteína separada por esse método perde a sua função. Para isso foi adicionado 2 gotas de TCA para que ocorresse o aparecimento do precipitado. A adição desse ácido favorece a precipitação da proteína e altera rapidamente o pH impedindo que a ovoalbumina se adapte.

• Para a reação não foi utilizado o HgCl2.

1. Explicar o efeito da adição de NaOH sobre o precipitado de ovoalbumina + HgCl2.

Resposta: Este experimento não foi realizado.

1. Com base nos resultados do experimento nº 5, diga qual é o ponto isoelétrico da caseína e explique porque.

Resposta: Ao realizar o experimento verificou-se que o ponto isoelétrico da caseína é em pH 4,7 aproximadamente, apresentando maior turvação e precipitação (as proteínas vão formando aglomerados que quanto maiores, tendem a precipitar). O ponto isoelétrico é onde a carga total da molécula de aminoácido ou proteína é nula.

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