A AVALIAÇÃO DE CONTAMINANTES MICROBIANOS EM PESSOAS E NO MEIO AMBIENTE

Francisca Regina[pic 1]

Hidelfonso

Iscarllety Richelly de Aguiar

Jéssica Betânea

AVALIAÇÃO DE CONTAMINANTES MICROBIANOS EM PESSOAS E NO MEIO AMBIENTE

                                         

Relatório apresentado na disciplina de Higiene  e legislação da indústria de alimentos, do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Piauí – IFPI.Profa. Dra. Regiane Gonçalves Feitosa Leal Nunes.                                                                                

TERESINA-PI

2022

SUMÁRIO[pic 2]

1 INTRODUÇÃO..........................................................................................................3

2 PARTE EXPERIMENTAL.........................................................................................4

2.1 MATERIAIS............................................................................................................4

2.2 PROCEDIMENTO..................................................................................................4

2.2.1 Coliformes Totais: Prova presuntiva...............................................................4

2.2.2 Prova confirmatória...........................................................................................5

3 RESULTADOS E DISCUSSÃO................................................................................6

3.1 PROVA PRESUNTIVA...........................................................................................6

3.2 PROVA CONFIRMATÓRIA....................................................................................7

3.2.1 Para as amostras de água do rio e do poço...................................................7

3.2.2 Para as amostras de alface e repolho.............................................................9

4 CONCLUSÃO.........................................................................................................11

REFERÊNCIAS..........................................................................................................12

1 INTRODUÇÃO

2 PARTE EXPERIMENTAL

2.1 MATERIAIS E REAGENTES

Foram utilizados os seguintes materiais e reagentes no laboratório de microbiologia do Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Piauí- IFPI.

• Alça de inoculação;
• Amostra de água do rio Parnaíba;
• Amostra de água de poço;
• Amostra de alface;
• Amostra de repolho;
• Banho-maria a 45 °C;
• Bico de Bunsen;
• Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST);
• Caldo Bili-lactose-Verde-brilhante (BVB);
• Caldo Escherichia coli (EC);
• Diluente com 225 mL de solução salina 0,85%
• Erlenmeyer de 500 mL;
• Estufa bacteriológica a 35 °C
• Micropipeta de 1,0 e 0,1 mL;
• Pipeta graduada de 10 mL;
• Tubos de ensaio;
• Tubos de Durhan.

2.2 PROCEDIMENTO

2.2.1 Coliformes Totais: Prova presuntiva

Para as amostras de alimentos sólidos (alface e repolho). Fez-se diluições seriadas pesando 25 g de cada amostra e transferindo-as para erlenmeyer de 250 mL do diluente, homogeneizando-as por, aproximadamente, 1 minuto. Essa foi a diluição inicial de 10-1. Para a segunda diluição, transferiu-se, assepticamente (próximo ao fogo), 1 mL da diluição 10-1 para um tubo de ensaio contendo 9 mL do diluente (10-2). E da mesma forma, procedeu-se para realizar a terceira diluição (10-3), retirando 1 mL da diluição 10-2. Após as etapas de diluições, foram inoculados uma série de três tubos de ensaio, contendo em cada tubo, 9 mL de caldo LST e tubos de Durhan invertidos, com 1 mL de cada diluição.

Para as amostras de água do rio e do poço, foram inoculados uma série de três tubos de ensaio, contendo em cada tubo 9 mL de caldo LST e tubos de Durhan invertidos, com 10 mL, 1 mL e 0,1 mL de cada amostra de água.

Em seguida, todos os tubos foram incubados, em estufa bacteriológica a 35°C por 48 horas. Após as 48h, os tubos de ensaio foram retirados da estufa e foram analisados quais deram resultados positivo, pela turvação do meio e pela formação de gás nos tubos de Durhan. Posteriormente, foram contados, os tubos positivos referentes a cada diluição.

2.2.2 Prova confirmatória

Com uma alça de inoculação, repicou-se os tubos de ensaio positivos do caldo LST, para os tubos de BVB e EC. Em seguida, incubou-se os tubos contendo caldo  BVB a 35°C por 48h numa estufa e os tubos com caldo EC foram colocados em banho-maria a 45°C por 48h. Os tubos contendo BVB expressam o NMP de coliformes totais, e os tubos com EC, o NMP de coliformes termotolerantes. Após as 48horas, os tubos foram retirados da estufa e do banho-maria e foi verificado os que deram positivo. Anotou-se os resultados e consultou a tabela para NMP.

3 RESULTADOS E DISCUSSÃO

3.1 PROVA PRESUNTIVA

 

No teste presuntivo para coliformes é utilizado o meio de cultivo Caldo Lauril Sulfato Triptose (LST), que é um meio de enriquecimento seletivo, para esses microrganismos (FERNANDES e GOIS, 2015). Os resultados desse teste estão expostos na Tabela 1.

Tabela 1 Resultados do teste presuntivos nas diferentes amostras

Amostras	Diluições	Amostras	Diluições
10 mL	1 mL	0,1 mL	10-1	10-2	10-3
Agua do rio	+ + +	+ + +	+ + +	Alface	+ + +	+ + +	+ + -
Água do poço	+ + +	+ + +	+ -  -	Repolho	+ + +	+ + +	+ + +

Fonte: Autores, 2019.

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