Análise dos resultados

Análise dos resultados

1. Determinação da concentração de proteína pelo método de Lowry

1. Determinação das quantidades de proteína;
2. Construa a curva de calibração representando a absorvância medida em função da quantidade de proteína padrão (μg);

[pic 1]

[BSA] = 0,43 mg/mL = 0,43 µg/ µL

𝑚1 = 0,43 × 0 = 0 µg

𝑚2 = 0,43 × 40 = 17,2 µg

𝑚3 = 0,43 × 80 = 34,4 µg

𝑚4 = 0,43 × 120 = 51,6 µg

𝑚5 = 0,43 × 160 = 68,8 µg

𝑚6 = 0,43 × 200 = 86 µg

	Quantidade de Proteína (µg)	Absorvância (680nm)	Média (Abs.)
1	0	0,091	0,051	0,071
2	17,2	0,229	0,173	0,201*
3	34,4	0,212	0,241	0,2265
4	51,6	0,363	0,328	0,3455
5	68,8	0,374	0,416	0,395
6	86	0,474	0,523	0,4985

[pic 2]

*Valor retirado de modo a obter uma curva de calibração mais precisa

[pic 3]

[pic 4]

[pic 5]

	Y - Absorvância	X - Quantidade de proteína (µg)
1	0,091	0
2*
3	0,212	34,4
4	0,363	51,6
5	0,374	68,8
6	0,474	86
1	0,051	0
2	0,173	17,2
3	0,241	34,4
4	0,328	51,6
5	0,416	68,8
6	0,523	86

*Linha eliminada de modo a obter uma curva de calibração mais precisa

[pic 6]

[pic 7]

1. Determine a concentração (μg/mL) de proteína nas amostras de gelatina e de citocromo c de fermento de padeiro. 
2. Determinação da concentração molar de citocromo c de fermento de padeiro na amostra fornecida:

Determinação da curva de calibração mais adequada:

Depois de esboçadas as curvas de calibração respetivas às tabelas 1 e 2 (gráfico 1 e 2, respetivamente), decidiu-se que a equação mais adequada para se trabalhar correspondia à equação da curva de calibração do gráfico 1, visto que apresentava o índice de dispersão (R²) mais próximo da unidade, ou seja, uma menor dispersão de valores. Assim todos os cálculos que se seguem, têm por base a equação: y = 0,0049x + 0,069;

Deste modo, rescrevendo a equação em ordem à quantidade de proteína (X), obtivemos:        

X = (Y – 0,069)/0,0049[Proteínan]

	Quantidade de proteína X (µg)	Absorvância Y
Animal	120,408	114,897	184,0811	0,659	0,632	0,9711
Vegetal	11,428	84,08122	83,06122	0,125	0,4812	0,4762
Citocromo C	74,897	80	83,061	0,436	0,461	0,476

Tabela 1 - valores de massa de proteína obtidos a partir da equação y = 0,0049x + 0,069 

1. Os valores destacados da gelatina animal apresentam uma discrepância relativamente aos restantes ensaios desta gelatina, portanto foram descartados na realização dos cálculos.
2. Os valores destacados para a gelatina vegetal apresentavam valores muito próximos dos valores da gelatina animal pelo que optamos excluí-los, para tal baseámo-nos no conhecimento teórico que indica que o expectável seria uma quantidade de proteína substancialmente maior na gelatina animal, comparativamente à vegetal.

Determinação da concentração mássica de cada proteína:

  (µg/ml)  [pic 8]

Volume Pipetado: 0,200 ml

Determinação da concentração molar de citocromo c de fermento de padeiro na amostra fornecida: