Detecção de aminoácidos e proteínas em solução por meio de reações de coloração
Por: LEYDED • 13/10/2015 • Resenha • 813 Palavras (4 Páginas) • 1.482 Visualizações
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Bioquímica estrutural
Detecção de aminoácidos e proteínas em solução por meio de reações de coloração
Introdução
As unidades constituintes fundamentais das proteínas são os aminoácidos. Estes, por sua vez, são moléculas orgânicas que possuem ligadas ao mesmo átomo de carbono (denominado de carbono α) um átomo de hidrogênio, um grupo amino, um grupo carboxílico e uma cadeia lateral R (característica para cada aminoácido). Essa cadeia é o que difere os aminoácidos em estrutura, tamanho e propriedade físico-química (Francisco Jr. e Francisco, 2006).
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Os aminoácidos podem formar macromoléculas pela ligação do grupo carboxila de um aminoácido com o grupo amino de outro, formando assim uma ligação peptídica.
Através de alguns métodos conseguimos identificar proteínas presentes em alimento. Um deles pode ser a reação de biureto.O Biureto é um reagente analítico, composto de Hidróxido de Sódio (NaOH 2,5N) e sulfato de cobre 1% (CuSO4).A reação do Biureto é detectar a presença de ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos. A reação é também positiva para substâncias que contêm 2 carbonilas (-CONH2) ligadas diretamente ou através de um único átomo de carbono ou nitrogênio.
Dependendo da complexidade da proteína ou do peptídeo em questão, a cor do produto de reação a presença do Biureto varia substancialmente: proteínas dão coloração violeta, peptídeos dão coloração rosa
Quais são as principais técnicas de coloração?
Reação de Ninhidrina
A ninhidrina (2,2-diidroxi-hidrindeno-1,3-diona) é um poderoso agente oxidante que reage com grupo de amino livres de aminoácidos, peptídeos e proteínas desde que o pH da solução esteja entre 4 e 8. A reação dos aminoácidos com a ninhidrina origina um composto de cor púrpura de Ruherman no geral, e amarelo para a prolina, não apresentando sempre a mesma intensidade de coloração.
A ninhidrina é comumente usada para detectar impressões digitais, já que, graças a sua reação com os amino grupos terminais das moléculas de lisina incorporadas nas proteínas ou peptídeos, é suficientemente sensível para revelar resíduos de pele.
Reação de
Relembrar a estrutura das proteínas, dando ênfase a estrutura primária (ligação pepitídica).
Verificar as propriedades das proteínas e aminoácidos através de reações calorimétricas diferenciais.
Método
Coloração de Biureto
No tubo 1 foi adicionado 2mL do reativo do Biureto mais 1 mL de água;
No tubo 2 foi adicionado 1 mL do reativo do Biureto de albumina 10%;
No tubo 3 foi adicionado 1 mL reativo do Biureto mais 1 mL da solução de aminoácido glicina à 1%;
No tubo 4 foi adicionado 1 mL reativo do Biureto mais 1 mL de leite sem ferver;
No tubo 5 foi adicionado 1 mL do reativo do Biureto mais 1 mL de leite fervido;
No tubo 6 foi adicionado 1 mL do reativo do Biureto mais 1 mL de solução de amido à 1%;
No tubo 7 foi adicionado 1 mL de reativo do Biureto mais 1 mL de óleo de cozinha;
No tubo 8 foi adicionado 1 mL do reativo do Biureto mais 1 mL do suco de fruta.
Resultados
No tubo 1 | o resultado foi negativo |
No tubo 2 | o resultado foi positivo |
No tubo 3 | o resultado foi positivo |
No tubo 4 | o resultado foi positivo |
No tubo 5 | o resultado foi positivo |
No tubo 6 | o resultado foi negativo |
No tubo 7 | o resultado foi negativo |
No tubo 8 | o resultado foi negativo |
Conclusão
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No tubo 1 não houve alteração devido o reativo não acusar a presença de aminoácido/proteína;
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No tubo 2 observou-se a mudança de coloração para uma cor roxa , acusando a presença de aminoácido/proteína;
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