Preparo de HCCA e BTS
Por: rkzZBR • 12/5/2015 • Artigo • 358 Palavras (2 Páginas) • 313 Visualizações
Guia de Referência Rápida para o Preparo da Matriz (HCCA)
Nota: este document foi criado para ser um guia de referência e não deve ser usado em substituição a bula do produto.
Número do produto 255344: 10 tubos por caixa; aprox. 250 testes por tubo:
- Após recebimento de nova entrega, armazenar a 0° ou abaixo de 0°.
Reconstituição e Armazenamento:
- Adicionar 250 mL de Solvente Orgânico
- Vórtex por 1 min
- Etiquetar com a data de preparação
- Uma vez recontituido, armazenar no escuro e em temperatura ambiente até 1 semana
- Vortex antes de cada utilização; checar formação de cristais no fundo do frasco
- Se houver formação de cristais, adicionar 30 µL de Acetonitrila e usar o vórtex; prepara nova matriz se os cristais não dissolverem
- Outra opção é centrifugar de cabeça pra baixo por 2 min em 13000 rpm e usar o sobrenadante
Preparação da Amostra:
- Use esfregaço direto ou extração com ác. Fórmico e inocule no poço da placa
- Secar em temperatura ambiente
- Cobrir o poço com 1 µL de HCCA
- Secar em temperatura ambiente
- Levar ao MBT para leitura
Nota: deve trabalhar rápidamente enquanto destampada devido a evaporação!!
Guia de Referência Rápida do Bacterial Test Standard (BTS)
Nota: este document foi criado para ser um guia de referência e não deve ser usado em substituição a bula do produto.
Número do produto 255343: 5 tubos por caixa; aprox. 40 testes por tubo:
- Após recebimento de nova entrega, armazenar a - 18° ou abaixo de 18°.
Reconstituição e Armazenamento:
- Adicionar 45 MICROLITROS de Solvente Orgânico
- Dissolver, pipetando gentilmente 20 x; evitar bolhas
- Deixar quieto em temperatura ambiente por 5 min
- Repetir homogeneização com pipeta (20x)
- Centrifugar 2 min em 13 rpm
- Aliquotar em microtubos Eppendorf e congelar - 18° C por até 5 meses; não recongelar após descongelamento; etiquetar com nome e data de preparo
Preparação da Amostra:
- Colocar 1 µL de BTS em 1 poço
- Secar em temperatura ambiente
- Imediatamente, cobrir com 1 µ de HCCA
- Secar em temperatura ambiente
- Levar ao MBT para calibração, após o preparo das demais amostras
Nota:
- deve trabalhar rápidamente enquanto destampada devido a evaporação!
- Se a calibraçção falhar, descongelar nova alíquota e repetir
- Se continuar falhando, reconstituir nono BTS
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